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Test d’interaction en levure perméable |
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En tant qu’experts du double-hybride , nous avons adapté notre technologie pour identifier, dans la levure, des molécules inhibant les interactions entre protéines. Hybrigenics a développé pour cela un ensemble d’outils et de savoir-faire spécifiques : > Des souches Y2H (systèmes Gal4 et LexA) ont été génétiquement modifiées afin d’améliorer leur perméabilité aux molécules de plus de deux ordres de grandeur par rapport aux souches parentales > Un ensemble de vecteurs Y2H permettant de moduler finement l’interaction et de faciliter son inhibition.
Principe du test d’interaction en levure perméable. L’interaction entre la Protéine 1 et la Protéine 2 est détectée grâce à la transcription du gène rapporteur en levure. Afin d’améliorer l’efficacité des composés, les souches perméables d’Hybrigenics sont déficientes pour les transporteurs à cassette ABC et leurs régulateurs transcriptionnels. Le criblage peut être effectué sur boîte ou en culture liquide grâce à des tests bGalactosidase quantitatifs. La toxicité des composés pour les levures est évaluée et les données sont utilisées pour normaliser les résultats.
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