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Le test d’interaction en HTRF® Version imprimable Convertir en PDF

(Homogeneous Time Resolved Fluorescence) une technique de FRET optimisée

L’HTRF est la technique de choix pour le développement d’un test d’interaction destiné au criblage à haut débit . Cette technologie, développée par Cisbio International, est basée sur la fluorescence en temps résolu. Le marquage direct ou indirect des deux protéines partenaires permet la détection et la quantification de votre interaction. Cet essai est homogène et ne nécessite que de faibles quantités de protéines.
Nous avons déjà développé de nombreux tests d’interactions en HTRF : interactions intracellulaires, protéases – co-facteurs, protéines virales – protéines hôtes, facteurs de transcription – co-activateurs et interactions entre protéines d’apoptose.
Afin d’optimiser la détection de l’interaction, nous testons de multiples tags pour le marquage et la purification des protéines, ainsi que de nombreux tampons d’interaction.
Contactez-nous pour plus d’informations.

Principe du test d’interaction en HTRF

 signal inhibition bysmall molecule

Principe du test d’interaction en HTRF.Les anticorps marqués par le donneur (Cryptate d’europium, EuK) ou l’accepteur (XL665) de fluorescence reconnaissent les tags sur chacune des protéines. L’interaction entre la protéine 1 et la protéine 2 est détectée par transfert d’énergie (excitation à 337 nm, émission à 665 nm). L’émission à 620 nm a lieu indépendamment de l’interaction et permet de normaliser le signal.


Principe du test protéase en HTRF

 protease assay

Principe du test protéase en HTRF.Les anticorps marqués par le donneur (Cryptate d’europium, EuK) ou l’accepteur (XL665) de fluorescence reconnaissent les deux tags sur le substrat de la protéase. Le clivage du substrat est détecté par l’absence de transfert d’énergie (excitation à 337 nm, émission à 665 nm). L’émission à 620 nm a lieu indépendamment du clivage et permet de normaliser le signal.


HTRF® est une marque déposée de Cisbio International

 
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